Выявление генов резистентности к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам в моче (кач., Моча разовая)

Подготовка к исследованию

Накануне сдачи анализа рекомендуется исключить острую, соленую пищу. По возможности не принимать ряд медикаментов (диуретики, витамины группы В, фурагин, аспирин) за 48 часов до исследования. Женщинам не рекомендуется сдавать анализ мочи во время менструации. Для исследования берется первая порция утренней мочи после проведения гигиенических процедур. Проведение исследования не рекомендуется на фоне антибактериальной и противовирусной терапии.

Описание

В последние десятилетия в России, как и во всем мире, отмечается стремительное распространение устойчивости возбудителей инфекционных заболеваний к антибактериальным препаратам. Развитие лекарственной резистентности приводит к появлению способности микроорганизмов сохранять свою жизнедеятельность, несмотря на применение этиотропной терапии. Локус исследования: моча.
Существуют несколько основных механизмов собственной устойчивости бактерий к антибиотикам: ферментативная инактивация, уменьшение проницаемости внешних структур микробной клетки, модификация внутриклеточной мишени, активное выведение лекарства, активация метаболического шунта.
Резистентность микроорганизмов может быть природной и приобретённой, но формирование её во всех случаях обусловлено генетически. Появление и распространение приобретенной резистентности составляет основную клиническую проблему, поскольку ее наличие у конкретной бактерии – возбудителя инфекционной болезни - невозможно прогнозировать. Гены, ассоциированные с этой способностью, зачастую локализованы на мобильных генетических элементах, что способствует их быстрому распространению между бактериями. Интенсификации этого процесса способствуют избыточное и необоснованное назначение антибактериальных препаратов; самолечение, сопровождающееся недостаточностью знаний об этиологии инфекционного процесса, спектре действия антибиотиков; использование АБП для лечения и стимуляции роста животных и птиц в сельском хозяйстве.
В последнее время активно появляются сообщения об устойчивости некоторых штаммов бактерий более чем к трем классам АБП (так называемая мультирезистентность или полирезистентность); ко всем АБП, кроме одного-двух классов (экстремальная резистентность); ко всем АБП (панрезистентность).
Бета-лактамные антибиотики относятся к активно применяемым препаратам. По химическому строению они разделяются на несколько групп: пенициллины, цефалоспорины, карбапенемы и монобактамы, общим компонентом которых является наличие бета-лактамного кольца. Бактериальные ферменты, способные расщеплять эти антибиотики и содержащие в своей структуре циклическую амидную связь, носят названия бета-лактамаз. К настоящему времени описано более 850 различных бета-лактамаз и их количество растет с каждым годом. На основе их важнейших свойств: субстратная специфичность к пенициллинам, цефалоспоринам, монобактамам, карбапенемам; хромосомная или плазмидная локализация; чувствительность к ингибиторам созданы различные системы классификации ферментов.
К бета-лактамазам широкого спектра относятся ферменты А2 (TEM, SHV), вырабатываемые представителями семейства Enterobacteriaceae и способные инактивировать пенициллины и цефалоспорины I-II поколения. Бета-лактамазы класса А2 расширенного спектра действия (БЛРС или ESBL) обеспечивают резистентность почти ко всем пенициллинам и цефалоспоринам I-IV поколения, а также часто обладают ассоциированной резистентностью к антибиотикам других классов. К этим ферментам относятся TEM, SHV, CTX.
Встречаются ферменты, способные инактивировать карбапенемы и другие беталактамные антибиотики. Эти карбапенемазы относятся к сериновым бета-лактамазам: молекулярный класс А (GES, KPC) и D (группы OXA-23-like, OXA-40-like, OXA-48-like, OXA-51-like и др.) или к металло-бета-лактамазам: класс В (IMP, VIM).
Бета-лактамазы-OXA, имеющие незначительные отличия в строении, объединяются в группы ферментов. Например, OXA-23-like – это группа ферментов, состоящая из 19 ферментов, подобных OXA-23.
Грамположительные микроорганизмы, устойчивые к АБП, также остаются этиологически значимыми, например, представители рода Staphylococcus. Наиболее патогенным среди них является вид S. aureus. Наличие метициллин-резистентности характеризует штаммы как MRS и MRSA.
Препаратами выбора при инфекциях, вызванных MRSA\MRS, энтерококками и другими грамположительными бактериями в настоящее время являются гликопептиды. Известны несколько типов ванкомицин-резистентности (VanA, VanB и др.). Важную клиническую значимость имеют VRSA и VRE.
Таким образом, устойчивость к АБП характеризуется высокой скоростью распространения, различается по группам бактерий, по группам лекарственных препаратов и варьируется по географическим областям.
Молекулярно-генетические методы позволяют выявлять гены, ассоциированные с резистентностью к АБП. Преимуществами такого подхода являются: высокая чувствительность скорость получения результатов, стандартизованность и технологичность исследования. Важно, что при проведении исследования не требуются манипуляции с живыми бактериальными культурами, а это, в свою очередь, служит предотвращению распространения и циркуляции микроорганизмов внутри лечебно-диагностических и лабораторных учреждений.
Результаты исследования для выявления генов резистентности к гликопептидным и бета - лактамным антибиотикам у бактерий методом ПЦР в режиме реального времени персонализированы, дают развернутую картину этиологии резистентности к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам, позволяют сократить сроки для выбора оптимальной антибактериальной терапии и снизить экономические затраты на лечение.

Показания к назначению

• Исследовании вспышек острых и хронических инфекций, связанных с оказанием
медицинской помощи;
• Верификации результатов фенотипических методов внутривидового типирования
(антибиотикорезистентности), направленного на выявление госпитальных штаммов;
• При слежении за циркуляцией международных эпидемических клонов в пределах
территориальных единиц, субъектов РФ и на национальном уровне.

Интерферирующие факторы

—

Причины отклонения показателей от нормы (повышенные значения)

—

Причины отклонения показателей от нормы (сниженные значения)

—

Метод:

ПЦР с детекцией в режиме реального времени;

Анализатор:

Детектирующий амплификатор ДТ-Прайм, ДНК-Технология, Россия;

Аналитическая чувствительность тест-системы:

95%

Аналитическая специфичность тест-системы:

95%